Ang mga kamakailang paglaganap ng sakit na dulot ng pagkain at mga bagong pagtatantya sa sakit na dala ng pagkain mula sa Center for Disease Control and Prevention o CDC ay posibleng naging impetus na nag-udyok sa kamakailang pagpasa ng food safety bill S.510. Bilang bahagi ng batas na iyon, kakailanganin ng FDA na lumikha ng mga bagong regulasyon sa kaligtasan para sa mga producer ng mga prutas at gulay na may pinakamataas na panganib. Ang tumaas na pakiramdam ng pagkaapurahan para sa ligtas na pagkain ay may mga nagtatanim ng pagkain at mga processor na muling sinusuri ang kanilang mga opsyon para sa pagsubok ng pagkain sa pinagmulan o sa field.
KARAGDAGANG MGA TEKNOLOHIYA NG PAGSUBOK
Makasaysayang gumamit ang mga grower at processor ng isa sa tatlong paraan para masuri ang bacteria: adenosine triphosphate (ATP) cleanliness monitoring system, culture testing at polymerase chain reaction (PCR) testing.
Ang mga sistema ng pagsubaybay sa kalinisan ng adenosine triphosphate ay nagsusuri para sa molekulang ATP, na matatagpuan sa lahat ng mga organikong materyales. Sinusukat ng ATP assays ang ATP mula sa mga selula ng hayop at gulay pati na rin ang buhay o patay na bakterya, lebadura o amag. Maaaring gamitin ang assay na ito sa mga non-organic na ibabaw upang matukoy ang kalinisan at nangangailangan na mayroong 10,000 hanggang 100,000 bacteria na naroroon upang makagawa ng sapat na ATP upang magresulta sa isang positibong pagtuklas ng bakterya.
Ang culture assay ay isang laboratory test na tumutukoy kung anong bacteria o yeast ang maaaring naroroon sa isang sample. Ang mga pagsusuri sa kultura ay nangangailangan na ang sample ay incubated para sa isang takdang oras, karaniwang 24 hanggang 48 na oras, upang bigyan ang bakterya ng pagkakataong lumaki upang matukoy ang presensya nito. Nangangailangan ito ng pagpapadala ng sample sa isang laboratoryo.
Ang PCR ay isang assay na gumagamit ng DNA upang subukan ang iba't ibang bacteria at pathogens. Ang proseso ay nagpapalaki ng isang piraso ng DNA na bumubuo ng libu-libo hanggang milyon-milyong mga kopya. Ito ay lubos na tumpak at tumatagal sa pagitan ng 12 oras at 26 na oras.
KARANIWANG PROBLEMA
Ang mga umiiral na teknolohiya ay may mga disbentaha na ginagawang hindi epektibo para sa mga layunin ng producer ng pagkain at ang hindi epektibong mga pagsusuri ay maaaring magresulta sa kontaminasyon sa pagkain, sakit, pagkawala ng kita at marami pang iba.
Sinusuri ng ATP ang pagsubok para sa pagkakaroon ng molekulang ATP, na naroroon sa lahat ng organikong materyal. Nangangahulugan ito na ang isang positibong pagsusuri sa ATP ay nagpapatunay lamang na ang organikong bagay ay naroroon - hindi kinakailangang bakterya. Ang assay na ito ay talagang isang pagsubok para sa kalinisan, o na ang ibabaw ay malinaw sa anumang buhay o patay na organikong materyal. Dahil sinusuri nito ang organikong materyal, hindi ito magagamit sa pagkain dahil organic ang pagkain. Bukod pa rito, hindi matukoy ng ATP assay ang biofilm, na isang malagkit na byproduct ng mga organismo na maaaring magtago ng mga live bacteria. Ang isa pang isyu sa pagsusuri sa ATP ay upang makabuo ng sapat na ATP upang lumikha ng isang positibong pagsubok, ang bakterya ay kailangang may bilang ng hindi bababa sa 10,000 bakterya.
Ang mga pagsusuri sa kultura sa pangkalahatan ay medyo tumpak, ngunit ang pamamaraan ay nangangailangan na ang bakterya ay incubated sa loob ng 24 na oras hanggang 48 na oras upang ma-verify ang pagkakaroon ng bakterya. Nangangahulugan ito na ang sample ay ipinadala sa isang laboratoryo para sa oras ng pagpapapisa ng itlog at binabasa ng isang sinanay na technician ang pagsubok. Ang pangangailangan para sa gawaing lab ay nagpapataas ng gastos sa end user at ang dagdag na oras ay nagpapataas ng mga pagkakataon na ang kontaminadong pagkain ay makalusot sa proseso.
Ang PCR assays, habang napakatumpak din, ay nangangailangan ng producer na ipadala ang sample sa isang lab kung saan ang isang sinanay na technician ay gumagamit ng mamahaling kagamitan upang iproseso ang pagsubok. Ang pagsusulit mismo ay binubuo ng ilang masalimuot na hakbang, na nagdaragdag sa mga gastos na ipinapasa sa producer ng pagkain. Ang mga pagsusuri sa PCR ay nangangailangan ng yugto ng pagpapayaman na tumatagal sa pagitan ng 8 oras at 20 oras, kasama ang 1 oras hanggang 4 na oras para sa aktwal na pagsubok. Ang mga idinagdag na hakbang at ang pagtaas ng oras ng mga gastos at ang mga pagkakataong hindi mapapansin ang kontaminasyon sa pagkain.
PAGSUSULIT NG ENZYME
Ang mga microbiologist ay nag-aaral at gumagamit ng mga enzyme para sa pag-detect ng bakterya mula noong unang bahagi ng 1950s. Marami ang huminto sa paggamit ng mga pamamaraan ng enzyme at lumipat sa mga teknolohiyang antigen/antibody o Nucleic Acid Amplification Testing (NAAT) noong 1970s at 1980s. Mula noon, gayunpaman, ang patuloy na pananaliksik sa enzyme ay humantong sa pagtuklas ng mga partikular na bacterial enzyme na nauugnay sa maraming iba't ibang microorganism. Ang impormasyong ito ay humantong sa pagbuo ng mga pinagmamay-ariang substrate na maaaring makilala at maiugnay sa mga partikular na enzyme na ibinibigay ng mga partikular na bakterya. Sa pamamagitan ng bagong impormasyon na mga pagsubok ay binuo upang magamit ang pagmamay-ari na substrates na kapag hydrolyzed sa pamamagitan ng isang enzyme ay gumagawa ng isang fluorescence na maaaring basahin sa pamamagitan ng isang fluorometer o sa pamamagitan ng pagdaragdag ng isang reagent upang makabuo ng isang reaksyon colormetric.
Dapat mahanap ng ibang mga diagnostic system ang bacteria cell mismo sa pamamagitan ng pagpapalaki ng sample sa mga kultura, o pagkopya ng DNA gamit ang PCR/NAAT system. Ang mga pamamaraang ito ay tatagal, sa karamihan ng mga kaso, ng higit sa isang araw upang makakuha ng mga resulta mula sa oras ng pagkolekta ng sample at nangangailangan sila ng mga sinanay na technician ng laboratoryo at mamahaling kagamitan. Gamit ang isang pamamaraan ng pagtuklas ng enzyme, ang bakterya ay maaaring gumawa ng libu-libong molekula ng isang enzyme, na nagpapataas ng posibilidad at oras na matukoy sa mas mabilis na bilis kaysa sa anumang iba pang paraan ng pagtuklas.
BACTERIAL ENZYME DETECTION KITS
Gamit ang pamamaraang ito, ang bacterial enzyme detection kit, na nasa manu-manong swab kit o digital handheld fluorometer kit, ay maaaring gamitin sa field upang subukan ang mga surface at pagkain para sa kabuuang mga organismo, gram-negative bacteria (Enterobacteriaceae). Kinukumpirma ng mga pagsusuri ang presensya o kawalan ng bakterya na higit sa normal na antas ng background na may mga resulta sa lugar sa loob ng 20 minuto. Ang mga pagsusuri ay madaling gawin, hindi nangangailangan ng karagdagang kagamitan at nakakakita din ng bakterya na nagtatago sa biofilm. Ang katumpakan ay higit sa 98 porsiyento kung higit sa 1,000 organismo ang naroroon sa bawat test strip kung ihahambing sa mga tradisyonal na pamamaraan. Ang mga kit ay idinisenyo upang magsilbi bilang isang tool sa pag-screen para maghanap ng "mga hot spot" na naglalaman ng mga hindi katanggap-tanggap na antas ng bacterial contamination. Dahil ang mga ito ay mura, mabilis at madaling gamitin, maaaring maisagawa ang mas madalas na pagsubaybay at pagsubok.
Mga Benepisyo
Maraming benepisyo ang Enzyme bacteria detection assays kumpara sa standard culture, ATP at PCR assays kabilang ang mas mabilis na bilis, kadalian ng paggamit, mas mataas na katumpakan, mas mababang gastos at ang kakayahang makakita ng biofilm. Ang mga pagsusuri ng enzyme ay nagbibigay ng mga resulta sa kasing liit ng 20 minuto mula sa sample hanggang sa resulta at ang mga resulta ay makukuha sa field o on site dahil hindi nila kailangan ang mga sample na ipadala sa isang laboratoryo. Gumagamit ang Culture o PCR assays ng mga espesyal na kagamitan at sinanay na technician kung saan ang mga assay ay hindi, ginagawa silang isang epektibo at murang tool sa screening para sa mga food grower at processor.
Konklusyon
Ang kasalukuyang kultura, ATP at PCR assays ay mahal, mabagal at masalimuot. Ang paggamit ng enzyme detection para sa pagtukoy ng bacteria sa field ay nagbibigay ng tumpak, mabilis at murang paraan para ma-screen para sa mga mapanganib na antas ng bacterial contamination. Ang pagkakaroon ng murang tool sa screening ay nangangahulugan na ang mga user ay makakapagsubok nang mas madalas at sa gayo'y lubos na tumataas ang rate ng tagumpay ng paghuli ng bacterial contamination bago ito makarating sa consumer.